一．分光光度法是環境監測中常用的方法，分光光度法的主要特點：

 (1) 靈敏度高；

 (2) 準確度高：   

 (3) 適用范圍廣；

 (4) 操作簡便、快速：

 (5) 價格低廉。

二．校正分光光度計波長的方法：

校正波長一般使用分光光度計光源中的穩定線光譜或有穩定亮線的外部光源，把光束導入光路進行校正，或者測定已知光譜樣品的光譜，與標準光譜對照進行校正。

三．分光光度法測定樣品時，選用比色皿應該考慮的主要因素：

 (1) 測定波長。比色液吸收波長在370nm以上時可選用玻璃或石英比色皿，在370nm以下時必須使用石英比色皿；

 (2) 光程。比色皿有不同光程長度，通常多用10.0mm的比色皿，選擇比色皿的光程長度應視所測溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1～0.7之間為宜。

四．如何檢查分光光度計的靈敏度：

靈敏度是反映儀器測量性能的重要指標，檢查方法為：配制0.001％重鉻酸鉀溶液，用1cm比色皿裝入蒸餾水作參比，于440nm處測得的吸光度應大于0.010。若示值＜0.010，可適當增加靈敏度的擋數，如仍不能達到該值，應檢查或更換光電管。

五．在光度分析中，消除共存離子的干擾的方法：

 (1) 盡可能采用選擇性高、靈敏度也高的TX試劑；

 (2) 控制酸度，使干擾離子不產生顯色反應；

 (3) 加入掩蔽劑，使干擾離子被絡合而不發生干擾，而待測離子不與掩蔽劑反應；

 (4) 加入氧化劑或還原劑，改變干擾離子的價態以消除干擾；

 (5) 選擇適當的波長以消除干擾：

 (6) 萃取法消除于擾；

 (7) 其他能將被測組分與雜質分離的步驟，如離子交換、蒸餾等；

 (8) 利用參比溶液消除顯色劑和某些有色共存離子干擾；

 (9) 利用校正系數從測定結果中扣除干擾離子影響。

六．用分光光度法測定樣品時，什么情況下可用溶劑作空白溶液?

當溶液中的有色物質僅為待測成分與顯色劑反應生成，可以用溶劑作空白溶液，簡稱溶劑空白。

七．一臺分光光度計的校正應包括哪4個部分?

波長校正：吸光度校正；雜散光校正；比色皿校正。

八．在光度分析中酸度對顯色反應主要有哪些影響?

 (1) 對顯色劑本身的影響；

 (2) 對溶液中各元素存在狀態的影響；

 (3) 對顯色反應的影響。

九．簡述朗伯-比爾定律A=kcL的基本內容，并說明式中各符號的含義：

朗伯—比爾定律是比色分析的理論基礎，它可綜合為光的吸收定律，即當一束單色光通過均勻溶液時，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。

式中：A—吸光度； k—吸光系數； C—待測物濃度； L—液層厚度。

十．簡述在朗伯-比爾定律中，吸光系數與摩爾吸光系數的區別。

在朗伯-比爾定律A=kcL中，K是比例常數，它與入射光的波長、溶液的性質有關。如果有色物質溶液的濃度c用g／L表示，液層厚度以cm表示，比例常數眾稱為吸光系數。如果濃度c用mol／L表示，液層厚度以cm表示，則比例常數k稱為摩爾吸光系數。摩爾吸光系數的單位為L／(mol·cm) ，它表示物質的濃度為1mol／L、液層厚度為1cm時溶液的吸光度。

十一．在光度分析中如何用鐠釹濾光片對光度計的波長進行校正。

用特制的鐠釹濾光片 (預先在精密度較高的儀器上進行校正過) 校正儀器波長時，通常用573nm和586nm的雙峰譜線校正。

十二．在光度分析中如何選擇顯色劑。

 (1) 顯色劑的靈敏度要高；

 (2) 顯色劑的選擇性要好；

 (3) 所形成的有色化合物應足夠穩定，而且組成恒定，有確定的組成比；

 (4) 所形成的有色化合物與顯色劑之間的差別要大；

 (5) 其他因素如顯色劑的溶解度、穩定性、價格等。

十三．在光度分析中共存離子的干擾主要的情況：

 (1) 共存離子本身有顏色影響測定；

 (2) 共存離子與顯色劑生成有色化合物，同待測組分的有色化合物的顏色混在一起；

 (3) 共存離子與待測組分生成絡合物降低待測組分的濃度而干擾測定；

 (4) 強氧化劑和強還原劑存在時因破壞顯色劑而影響測定。

十四．在光度分析中引起偏離光吸收定律的原因：

 (1) 由于入射光單色性差而引起偏離：

 (2) 由于溶液中的化學變化而引起偏離 (待測物質離解、締合) ；

 (3) 由于介質的不均勻性而引起偏離。