一．實驗原理

連續流動注射分析的原理是運用經典比色法方法，測定揮發酚的化學反應單元基于4-氨基安替吡啉直接分光光度法(GB/T5750.4.9-2006）。樣品用濃磷酸酸化至pH＜4，在酸性條件下，樣品通過150℃在線蒸餾釋放出酚，被蒸餾出的酚類化合物，加入弱堿性（pH=10）鐵氰化鉀溶液，與4-氨基安替吡啉反應生成橙黃色的安替吡啉染料，于505nm波長處測定吸光度。

連續流動注射儀通過蠕動泵壓縮不同內徑的彈性泵管，將試劑、試樣和氣體按比例吸入管路系統中，用空氣氣泡把樣品試劑阻隔開來，使試樣片段在連續流動的系統中混合均勻、蒸餾、保溫反應，顯色后測吸光度，通過數據轉換器和軟件實現自動連續測量和數據處理。 

二．實驗儀器與試劑

儀器：荷蘭SKALAR公司San++自動分析儀、SA1100自動取樣器、SA5000化學反應單元、N86蠕動泵、低溫恒溫槽、儀器控制與數據處理系統。

試劑A：蒸餾試劑，50mL85%的磷酸(H3PO4)溶于400mL純水，然后加入純水至500mL。

試劑B：4-氨基安替吡啉溶液，將130mg4-氨基安替吡啉溶于180mL純水，加純水至200mL后再加入1mL聚氧乙烯月桂醚(Brij35)搖勻。

試劑C：鐵氰化鉀溶液，取0.4g鐵氰化鉀、0.6g硼酸和1.0g氯化鉀溶于180mL純水，用1mol/L的氫氧化鉀調pH至10.3后加純水至200mL。

三．測定方法

打開連續流動注射分析儀電源，放下空氣拉環，打開蠕動泵，開水浴15℃。

將揮發酚的試劑管放入純水中走水20min，打開加熱器，開氮氣，減壓閥調至0.1mPa，流量（70~80單位）。等加熱器溫度達到設定值，將試劑管放入相應的試劑瓶中，選擇分析項目，觀察基線。等基線穩定后，開始分析。 

四．異常現象與處置

基線異常

日常分析必須在基線走平之后才能進行，基線異常是常見故障。基線出現鋸齒狀毛刺時，形成原因可能是氣泡不均勻，應檢查空氣管及模板上的連接口是否有松動或彈性下降，進行重接或更換。

基線出現短促的跳動時則可能是因為試劑未脫氣或電壓不穩，應將配制試劑用水先脫氣。當基線出現不規則蔓延性波動時，除了觀察氣泡均勻性還應當檢查試劑是否為新鮮配制、比色杯是否被污染、泵管接口是否有阻塞現象。試劑有雜質時應先過濾，比色杯難以清洗時，應用注射器從脫泡管里打入重鉻酸鉀放置浸泡，不宜放入超聲波儀里清洗，以免損壞。基線連續飄高或飄低時，還應檢查試劑溫度，冰箱取出的試劑應平衡至室溫后使用。當基線比平時低很多時，應檢查試劑或取樣器沖洗液是否被污染，更換新配制的試劑。

峰形異常

當同一位置峰高不一致，可能原因是進樣空氣泡太小，可延長進樣空氣時間；也可能是泵管彈性下降，需檢查更換泵管。當同一位置出現有規律的肩峰，可能原因是沖洗閥漏氣，應檢查沖洗閥接口。

當峰形不同位置出現不同形狀時，應檢查進樣管和樣品基質，進樣管有部分堵塞應將其更換；樣品有混濁時應先過濾，應調節樣品酸堿度與取樣器沖洗液酸堿度一致。如配制標準時加入硫酸銅，每升樣中也加入1g硫酸銅。取樣管太長或受污染，氣泡流動過程中會分裂，會引起出現峰粘連或拖尾，應清洗或更換。
標準曲線異常

標準曲線應經過或接近原點，當曲線截距（空白值）較大時，原因可能是配制標準的水受到被測成分的污染，應更換新的稀釋液；也可能是標準系列與沖洗液之間酸堿性不融洽，應調節標準系列與沖洗液樣品pH值和基質濃度盡量一致。標準曲線出現偏低離群點時應檢查標準管加樣量是否充足。

綜上所述，連續流動注射分析儀使用中的維護保養非常重要，要定期清洗、加潤滑脂、檢查泵管，并設置、完善維護記錄本，出現故障和更換配件的情況都應當做好記錄。