關于儀器的預熱問題
在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預熱時間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計,開機后儀器自動進入自檢 (初始化)狀態,約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個環節上,很多使用者或多或少存在問題,如開機只預熱電路系統 (不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等等。
對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機后儀器自檢 (初始化)結束后,在測定窗口上,設置所需波長值, 用一個吸收池裝上純凈水置于光路上,調“0000A”后,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化后即可進行測定。
對于紫外可見分光光度計,由于有雙光源 (鎢燈與氘燈), 為了延長燈的使用壽命,開機自檢完成后可以關掉測定時不用的光源燈。
關于吸光度測定重復性的問題
分光光度計在測定過程中,發現同一個溶液在不同時問里其測定結果不同,即重復性不好,其原因是什么?排除測定錯誤因素外,可 能原因有:
(1)儀器預熱時間不夠或預熱方法不對所造成,應延長預熱時間或采用正確的預熱方法。
(2)光電轉換器 (如光電管)因長時間使用其光電轉換 效率發生了變化導致。這時標準溶液與待測溶液的吸光度都
同樣變低,在相對定量時對結果影響很小。但是對這類儀器,一般建議連續使用時間不應超過3h,若需長時間使用,間歇30min 。